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食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒

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测定意义

在食品中,亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定,在食品加工业中作为保色剂,以维持肉制品的良好外观,并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生,提高食用肉制品的安全,但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品,可诱发消化系统癌变。


测定原理

在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物,在540nm处有特征吸收峰。


自备实验用品及仪器

天平、研钵或匀浆器、水浴锅、酶标仪、96孔酶标板、蒸馏水。


试剂组成和配制

提取液一:液体50 mL×1瓶,室温保存。

提取液二:液体50 mL×1瓶,室温保存。

提取液三:液体50 mL×1瓶,室温保存。

提取液四:粉剂 100 mg ×1支,室温保存。

试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。


样品处理

称取样品约0.5g,破碎,加入0.5 mL 提取液一,沸水浴15min,冷却至室温,加入0.5 mL提取液二,震荡摇匀,加0.5 mL 提取液三,用镊子加少量提取液四(约2 mg),静置30min10000 rpm25℃,离心15 min,取上清液待测。


测定步骤和操作表

 

空白管

测定管

样品(mL

 

0.05

试剂一(mL

0.1

0.1

试剂二(mL

0.1

0.1

H2O

0.05

 

混匀,室温静置15min,以空白管调零,测定A540 (注:空白管只需测定一次)。    


亚硝酸含量计算

标准曲线回归方程为:y= 0.011x + 0.0216R2= 0. 9991 

=无间×A540测定管 - 0.0216 × 5×1.5÷样品质量

= 0.682×A540测定管 - 0.0216 ÷样品质量


注意事项

1. 试剂盒2-8℃保存。

2. 试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。

3. 若检测出得OD值在标准曲线范围外,请将样品进行适当的浓缩或稀释(A540 <0.03浓缩,A540 > 2.8 适当稀释)。

 

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